Olimlar qushqoq terisini vatali tampon bilan yengil silkitish orqali yo'q bo'lib ketayotgan turlarni o'rganish uchun yetarli darajada yuqori sifatli DNKni zarar yetkazmasdan to'play olish mumkinligini namoyish etdilar. Bu yutuq Hindistonning G'arbiy Ghatlari va shahar hududlarida ekologik choralar uchun yangi yondashuvni taklif qiladi, bu yerda amfibiyalarning taxminan yarmi yo'q bo'lish xavfi ostida turibdi.
Bu minimal invaziv usul turli xil turlar va o'lchamlarga samarali ekanligi sababli, tadqiqot guruhining tabiatni o'rganishning axloqiy asosini taqdim etgan. Avval tadqiqotchilar ko'pincha amfibiyaning to'qimasini olish uchun kichik barmoq yoki dum uchlarini olib tashlash kabi invaziv va og'riqli usullardan foydalanishardi.
Srishti Manipal san'at, dizayn va texnologiyalar instituti o'qituvchisi va yangi tadqiqot muallifi Professor Gururaj K. aytadiki, uzoq muhokamalardan so'ng jamoa an'anaviy usullar, masalan, qurbaqa urug'larining dumlarini olish, tuxumni yig'ish, barmoqlarni kesish yoki yonoq surtmasini olish o'rniga teridan namuna olishni sinab ko'rishga qaror qildi.
Yangi tadqiqot Srishti Manipal san'at, dizayn va texnologiyalar instituti, Manipal texnologiyalar instituti va Ashoka ekologiya va atrof-muhit tadqiqotlari fondi olimlari tomonidan amalga oshirildi. Ish yetti xil qurbaqa va qo'ng'iz guruhlaridan 88 nafar individga qaratilgan edi. Tadqiqot shuni ko'rsatdiki, hayvonning orqa, qorin va oyoqlari bo'ylab vatali tampon bilan 60 miltillik yumshoq tegishlar orqali olimlar hayvoning butun genetik kodini xaritalash uchun yetarli miqdorda teridan ajralib chiqadigan hujayralarni to'plashi mumkin.
Bu yangi usul amfibiyalar insonlar kabi doimiy ravishda DNKni o'z ichiga olgan terining hujayralarini tashlab yuborishi faktiga asoslanadi. Keyin olimlar polimeraza zanjir reaksiyasi (PCR) deb nomlangan jarayondan foydalanib, ma'lum bir genni, bu holda 16S rRNA genini, sekventlash uchun yetarli material bo'lguncha ko'p marta kuchaytirish yoki nusxalashadi. Sekventlash DNKdagi A, T, Ts, G kimyoviy harflar ketma-ketligini o'qish imkonini beradi, bu esa yangi turlarni aniqlashga, kasalliklarni kuzatishga va turli populyatsiyalar o'rtasidagi qarindoshlik aloqalarini tushunishga yordam beradi.
Jamoa tamponlar yordamida to'plangan namunalarning 86% dan ortig'i muvaffaqiyatli DNK nusxasini berganini, va 67% sekventatorlar uchun yetarlicha toza ekanligini aniqladi. Usulning lapangan tadqiqotchilari uchun amaliyotga mosligini tekshirish maqsadida, jamoa tamponlarni saqlash va qayta ishlashning turli usullarini sinab ko'rdi. Ular professional laboratoriya to'plamini tuzilish bilan solishtirishdi, bu esa bir xil natijalar hosil qilinishini tekshirish uchun arzonroq, asosiy tuz bilan ekstraksiya usulini sinash edi.
Shuningdek, tamponlarni spirtda nam yoki quruq holatda saqlash kerakligi tekshirildi. Ikkala ekstraksiya usuli ham o'xshash miqdorda DNK bergan bo'lsa-da, professional to'plamlar yanada toza namunalar ta'minladi. Qiziq tomoni shundaki, tadqiqotchilar quruq tamponlar aslida suyuqlikda saqlanganlarga qaraganda yuqori tozalikni ta'minlashini aniqladilar, bu esa chekka tropik o'rmonlarda kimyoviy moddalar bilan og'ir shishalardan foydalanish zaruriyati bo'lmagan holda namunalarni tashish va saqlashni soddalashtiradi va arzonlashtiradi.
Bu ish tropik Hindistonning murakkab, nam sharoitlarida turli o'lchamdagi ko'plab turlarda tamponlar yordamida namuna olish usulining batafsil sinovdan o'tkazilgan birinchi holatidir. Boshqa hududlardagi juda kichik qurbaqalarni o'rganuvchi avvalgi tadqiqotlar ba'zan tamponlardan yetarli miqdorda DNK olishda qiyinchiliklarga duch kelgan bo'lsa-da, ushbu tadqiqot 13 millimetrlik Microhyla turkumiga mansub eng kichik individlar bilan ham muvaffaqiyatga erishdi. Bundan tashqari, tadqiqotchilar hayvonlarni chiqarib yuborganlaridan keyin kuzatib borishdi va ko'plab qurbaqalar deyarli darhol qichqirishni boshlaganini payqadilar, bu jarayon ularda an'anaviy usullarga nisbatan sezilarli darajada kamroq stress keltirganini ko'rsatadi.
Biroq, tadqiqotchilar tampon samaradorligi qurbaqa terisining teksturasiga juda bog'liqligini tan oladilar — u silliq va shilliq bo'ladimi yoki quruq va tugunli bo'ladimi. Masalan, tugunli teri bo'lgan Malabar daraxti qo'ng'iz yaxshi natija bergan bo'lsa-da, tadqiqotchilar terining turli turlari samaradorlikka erishish uchun tampon bilan turli miqdordagi tegishlarni talab qilishi mumkinligini ta'kidladilar. Ular shuningdek, usul ularning turlarni aniqlash uchun ajoyib bo'lsa-da, yanada murakkab genetik tadqiqotlar hali ham an'anaviy to'qima namunalaridan olinadigan katta hajmdagi DNKni talab qilishi mumkinligini ta'kidladilar. Shuning uchun ular kelajakdagi tadqiqotchilarga ideal muvozanatni topish uchun o'z maqsadli turlarida sinov tadqiqotlarini o'tkazishni tavsiya etishadi.
Amfibiyalar muhim bioindikatorlardir, chunki ularning holati butun ekotizim sog'lig'ini aks ettiradi. Ushbu axloqiy, iqtisodiy jihatdan samarali va ishonchli hayvonlarni monitoring qilish usulini taqdim etish orqali, tadqiqotchilar hayotiy muhim ma'lumotlarni tezroq va insonparvarroq to'plash imkonini beradi. Bu hayvonlar ustida tadqiqotlarni yanada insonparvar qilishni maqsad qilgan global 3R — Almashtirish, Kamaytirish va Takomillashtirish konsepsiyasiga mos keladi. Bundan tashqari, yangi yondashuv yo'q bo'lib ketayotgan turlarni saqlash intilishimizda ularga keraksiz azob yetkazmayotganligimizni kafolatlaydi, biz tabiatni himoya qilishimizga va undagi mavjudotlarning hayotiga hurmat bilan qarashimizga imkon beradi.
